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液相色谱中峰出现拖尾或出现双峰的原因？

1、筛板堵塞或柱失效，解决办法是反向冲洗柱子，替换筛板或更换柱子。

2、存在干扰峰，解决办法为使用较长的柱子，改换流动相或更换选择性好的柱子。

3、可能柱超载，减少进样量。

HPLC灵敏度不够的主要原因及解决办法是什么？

1、样品量不足，解决办法为增加样品量

2、样品未从柱子中流出。可根据样品的化学性质改变流动相或柱子

3、样品与检测器不匹配。根据样品化学性质调整波长或改换检测器

4、检测器衰减太多。调整衰减即可。

5、检测器时间常数太大。解决办法为降低时间参数

6、检测器池窗污染。解决办法为清洗池窗。

7、检测池中有气泡。解决办法为排气。

8、记录仪测压范围不当。调整电压范围即可。

9、流动相流量不合适。调整流速即可。

10、检测器与记录仪超出校正曲线。解决办法为检查记录仪与检测器，重作校正曲线。

怎样解决做HPLC分析时，柱压不稳定，原因何在？

1、泵内有空气，解决的办法是清除泵内空气，对溶剂进行脱气处理；

2、比例阀失效，更换比例阀即可；

3、泵密封垫损坏，更换密封垫即可；

4、溶剂中的气泡，解决的办法是对溶剂脱气，必要时改变脱气方法；

5、系统检漏，找出漏点，密封即可；

6、梯度洗脱，这时压力波动是正常的。

出现峰展宽的原因？

1、样品体积过大——用流动相配样,总的样品体积小于第一峰的15%。

2、在进样阀中造成峰扩展——进样前后排出气泡以降低扩散。

3、数据系统采样速率太慢——设定速率应是每峰大于10点。

4、检测器时间常数过大——设定时间常数为感兴趣第一峰半宽的10%。

5、流动相粘度过高——增加柱温,采用低粘度流动相。

6、检测池体积过大——用小体积池,卸下热交换器。

7、保留时间过长——等度洗脱时增加强溶剂含量,也可用梯度洗脱。

8、柱外体积过大——将连接管径和连接管长度降至最小。

9、样品过载——进小浓度小体积样品。

简单判断比例阀是否内漏？

设定泵使用一个单独通路（A），打开Purge阀，流速5mL/min，提起其他溶剂瓶内的溶剂过滤头直至离开液面，观察这些通路（B、C、D）内的溶剂是否随着流动，正常时均不应流动。